Réactifs de référence

Lignes directrices pour la préparation, la validation et la distribution de réactifs de référence approuvés par l’OMSA pour le diagnostic des maladies animales infectieuses (mise à jour décembre 2024)

Les critères généraux suivants doivent être remplis pour la reconnaissance par l’OMSA d’un matériel de référence distribué par un Centre de référence pour un test de diagnostic permettant la détection d’un agent pathogène ou d’anticorps spécifiques à une maladie :

1. Adapté à l’usage
Normes de référence positives (PRS, de l’anglais « Positive Reference Standards ») : le matériau doit contenir l’échantillon ou l’analyte ciblé par la méthode de diagnostic ciblée. Le PRS doit être, au moins, à la concentration nécessaire pour la détection à l’aide des protocoles standard acceptés par les Centres de référence de l’OMSA, tels que décrits dans le Manuel terrestre de l’OMSA.
Normes de référence négatives (NRS, de l’anglais « Negative reference standards ») : le matériel doit être choisi parmi des animaux ou tout autre matériaupertinent n’ayant  jamais été exposé ou vacciné contre l’agent pathogène cible. Le NRS doit être exempt d’anticorps spécifiques, d’antigènes et de matériel génétique provenant d’organismes susceptibles pouvant provoquer des réactions croisées avec l’agent pathogène cible lors du test standard.
Pour être considérée comme utile en tant que norme de diagnostic et pour répondre aux demandes des laboratoires de diagnostic, un nombre minimum de 50 aliquotes doit être disponible.
Chaque lot doit être étiqueté de manière appropriée, avec une sécurité, une homogénéité et une stabilité prouvées (point 3).

2. Sécurité
Les normes de référence doivent être préparés de manière à ce qu’il soit démontré qu’ils sont exempts de matières infectieuses à l’aide d’une procédure validée. Un certificat de sécurité doit être fourni sur demande.
Les normes devraient être soumis à des essais d’innocuité appropriés, tels que décrits au chapitre 1.1.9 du Manuel terrestre, afin de s’assurer qu’ils sont exempts d’agents vivants détectables.

3. Homogénéité et stabilité
L’homogénéité doit être évaluée pour chaque lot de matériau de référence par des essais répétés d’aliquotes indépendantes (point 5). Compte tenu de la stabilité, celle-ci doit être surveillée dans le temps. Le fournisseur doit veiller à ce que l’emballage, le stockage et le transport soient dans des conditions correctes.

4. Origine
Le matériel doit être préparé par un Centre de référence et conformément à la norme ISO 17034 ou au moins par un laboratoire accrédité avec ISO17025 pour l’agent pathogène cible. Un document technique (fiche technique) décrivant l’origine, la préparation, les données de validation et les exigences de stockage du matériau doit être fourni afin que tout laboratoire puisse évaluer si le matériau de référence possède les caractéristiques requises et ne pose aucun problème réglementaire ou de biosûreté/biosûreté.

5. Utilisation et résultats attendus

Le document technique doit fournir les informations nécessaires sur la manière de préparer le matériau pour son utilisation finale. Par exemple, il pourrait inclure des instructions appropriées pour la reconstitution, la méthode de stockage après reconstitution, la durée de conservation et la méthode de dilution pour atteindre la valeur cible attendue (par exemple, pour les positifs forts à utiliser pour préparer les positifs faibles). Le document doit indiquer la valeur attendue (Ct pour la PCR en temps réel, % de compétition pour le C-ELISA, etc.) avec un écart-type à la dilution cible, sur la base d’essais utilisant des protocoles standard acceptés par les Centres de référence de l’OMSA. La valeur moyenne attendue et l’écart-type associé doivent d’abord être calculés en faisant tester trois répétitions intra-essai de huit aliquotes du matériau pendant quatre jours différents par plus d’une personne par plus d’une personne. La méthode à utiliser pour déterminer la valeur moyenne attendue et l’écart-type associé est laissée à la discrétion du Centre de référence, guidé par le chapitre 1.1.6 du Manuel terrestre, mais il est recommandé que cette information soit décrite dans le document technique.

6. Approbation des étalons de référence par l’OMSA

Une norme internationale de référence ne peut être publiée sous le nom de l’OMSA que si elle a été approuvée par la Commission des normes biologiques.
Les données techniques et statistiques complètes sur l’évaluation des normes de référence candidates, ainsi que les informations complètes spécifiées ci-dessus (points 1 à 5) doivent être soumises à l’OMSA. La Commission des normes biologiques examinera ces informations. Si la Commission approuve, la norme de référence sera ajoutée à la liste des normes de référence internationales disponibles. Cette liste sera fournie à tous les membres de l’OMSA sur demande, et sera également accessible sur le site web de l’OMSA.